构建MTB突变菌株（基因敲除法）
采用噬菌体介导的同源重组进行基因敲除：首先构建同源交换位点（AES），随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组，获得噬菌粒（phasmid）；将噬菌粒导入耻垢分枝杆菌，获得整合有同源交换位点的重组噬菌体，经体外扩增获得高滴度的重组噬菌体，对结核分枝杆菌进行转染；
原核表达载体
原核表达载体http://www.axybio.com/vectorstrain/prokaryotic-expression-vector.html
过表达稳定细胞系建立
利用具有抗性筛选基因的常规表达载体转染细胞，通过抗性筛选，建立稳定高表达外源基因的细胞系；利用具有抗性筛选基因的慢病毒液感染细胞，通过抗性筛选，建立稳定高表达外源基因的细胞系。
基因克隆与表达质粒构建
指发生在基因水平上的分子克隆（DNA克隆），即将编码某一多肽或蛋白质的基因（外源基因）组装到细菌质粒（克隆载体）中，再将该重组质粒转入大肠杆菌体内，使其随大肠杆菌增殖而进行复制。由于质粒具有不相容性，